شناسایی ویروس‌های آلوده کننده کدوئیان منطقه شیراز و حومه با استفاده از آزمون‌های سرولوژیک و مولکولی

نویسندگان

چکیده

به منظور بررسی و تعیین ویروس­های خسارت­زای مزارع کدوئیان در مزارع شیراز و حومه (کفترک، بابونک، تفیهان، داریون، بیدزرد، ظفرآباد، کوشک بیدک، صدرا و دوکوهک) 57 نمونه از خانواده کدوئیان در تابستان سال 1391جمع­آوری گردید. برای تمامی نمونه­های جمع­آوری شده با  استفاده از سه آنتی سرم محلی CMV، ZYMV و SqMV آزمون الایزای غیر‏مستقیم انجام گرفت. جهت تایید آزمون سرولوژِیکی، بر روی تعدادی از نمونه­ها آزمون مولکولی ترا نویسی معکوس واکنش زنجیره­ای پلیمراز (RT-PCR) با استفاده از آغازگرهای اختصاصی مربوطه انجام پذیرفت. نتایج نشان داد که مهم­ترین ویروس­های خسارت­زا در این مناطق به ترتیب ویروس موزائیک خیار (CMV) با 1/49درصد آلودگی، با علائم زردی و پیسه­ای سبززرد، ویروس موزائیک زرد کدو (ZYMV) با 1/35 درصد آلودگی با علائم پیسه ای سبز و بند کفشی و بد شکلی، ویروس موزائیک کدو (SqMV) با 8/29 درصد آلودگی که در نمونه طالبی آلوده به این ویروس تنها زردی در سطح برگ و نمونه کدو آلوده به این ویروس حالت پیسه‏ای در سطح برگ مشاهده شد. همچنین در برخی مکان­ها، آلودگی همزمان به چند ویروس مشاهده گردید. 9 نمونه دارای آلودگی همزمان به سه ویروس CMV، ZYMV و SqMV با 8/15درصد آلودگی که در آنها علائم پیسه­ای، تاولی با تاول­های بزرگ و بندکفشی و بدشکلی بسیار شدید برگ مشاهده شد. هفت نمونه دارای آلودگی همزمان به دو ویروس CMVوZYMV با 3/12 درصد آلودگی که علائم زردی، پیسه­ای، بند­کفشی و تاولی در نمونه­های دارای آلودگی همزمان به این دو ویروس دیده شد. پنج نمونه دارای آلودگی همزمان به دو ویروس CMV و SqMV با 7/8 درصد آلودگی که علائم آنبه صورت تاول­های ریز سبزرد فراوان در سطح برگ بود. یک نمونه دارای آلودگی همزمان به دو ویروس ZYMV و SqMV با 7/1 درصد آلودگی بودند.

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

Detectionof cucurbits infecting viruses in Shiraz zone and suburbs by using serological and molecular methods

نویسندگان [English]

  • Zahra Zollanvari
  • Sasan Ghasemi
  • Ali Pakniat
چکیده [English]

During summer 2012, fifty-seven cucurbits samples were collected in order to determine their viral diseases in cucurbits fields of Shiraz and suburbs (Kaftarak, Baboonak, Tafihan, Daryan, Bidzard, Zafar abad, Kooshk-e- bidak, Sadra and Dokoohad). Samples were examined by using three local antisera, CMV, ZYMV, SqMVby indirect ELISA. ELISA results were confirmed by RT-PCR with specific primer pairs for each virus. Results showed that the most important damaging viruses in these zones were Cucumber mosaic virus with 49.1% with showed yellowing,chlorosis and leaves deformation, Zucchini yellow mosaic virus with 35.1% infection induced mottling, sever shoestring and blusters on leaf surface and Squash mosaic virus with 29.8% incidence with leaf yellowing and mottling on cantaloupe and squash respectively. Furthermore, in some places mixed infections to sort of viruses were seen. Nine samples were infected by CMV, ZYMV and SqMV (15.8%) showing mottling and large blusters with sever shoestring and leaf deformation. Seven samples were infectedby CMV and ZYMV (12.3 %) with partially mottling and shoestring, five samples by CMV and SqMV (8.7%) in which small green blusters on leaves were seen and finally one samples to SqMV and ZYMV (1.7%).

کلیدواژه‌ها [English]

  • cucurbits viruses
  • mixed infection
Agrios,  G.N. 2005. Plant Pathology. Fifth edition. Florida: Dana  Dreibelbis.

Azarfar, A., Izadpanah, K., Afsharifar, A., &Massumi, A. 2012. Purification and the complete sequence of Zucchini mosaic virus Fars isolate. Plant Pathology, 48: 403-409.

Beserra Junior, J. E. A., Andrade, E. C.,AraújoCamarço, R. F. R.,Nascimento, A. K. Q.,& Lima, J. A. A. 2011. Sequence variability in the coat protein gene of Cowpea severe mosaic virus isolates from northeastern Brazil.Tropical Plant Pathology, 36(2): 121-124.

Converse, R. H. & Martin, R. R. 1990. ELISA methods for plant viruses. pp: 179-196 .In: Hampton, R. O., Ball, E. M. and DeBoer, S. H. (Eds.) Serological Methods for Detection and Identification of Viral and Bacterial Plant Pathogens, A Laboratory Manual . APS Press, USA.

Desbiez, C. & Lecoq, H.1997. Zucchini yellow mosaic virus. Plant Pathology, 46:809-829.

Diaz, J. A., Mallor, C., Soria, C., Camero, R., Garzo, E., Fereres, A., Alvarez, J. M., Gomez-Guillamon, M. L., Luis-Arteaga, M. & Moriones, E. 2003. Potential sources of resistance for melon to nonpersistently aphid-borne viruses. Plant Diseases, 87:960-964.

Gholamalizadeh, R., Vahdat, A., Keshavarz, T., Elahinia, S. A., Sharaeen, N. & Bananej, K. 2008. Occurrence of Ourmia melon virus in the Guilan Province, Iran. Acta Virology, 5 :113-118.

Habili, N., Arthur, K., Davies, R. & Randles, J. W. 2012. Detection of dual infection with Grapevine rupestris stem pitting-associated virus and Uncinulanecator in grapevines by single-tube RT-PCR. 17th Meeting of the International Council for the Study of Viruses and Virus-like Diseases of the Grapevine (ICVG). October 7-14 2012, UC Davis, California, USA, pp 148-149.

Hosseini Farhangi, S., Masahebi, Gh., KoohiHabibi, M. & Okhovat, M. 2004. Identity of Zucchini yellow mosaic virus characteristicsin Squash fields of Tehran province. Proceeding of the 16th Iranian Plant Protection Congress, Tabriz University, Tabriz, Iran, p. 265.

Kundu, A. K. Ohshima, K. Sako, N. & Yaegashi, H. 1997. Nucleotide sequences of the cylindrical inclusion protein genes of two Japanese zucchini yellow mosaic virus isolates. Acta Virologica, 43:57-62.

Khoshkhatti, N. & Jafary, H. 2010. Distribution of Cucumber mosaic virus (CMV) on cucurbit plants in Zanjan province. Proceeding of the 19th Iranian Plant Protection Congress, Iranian Research Institute of Plant Protection, p. 680.

Lecoq, H., Dafalla, G., Desbiez, C., Wipe-Schiebel, C., Dellecole, B., Lanina, T., Ullah, Z. & Gramet, R. 2001. Biological and molecular characterization of Morrocan Watermelon Mosaic Virus and a potyvirus isolates from eastern Sudan. Plant Disease, 85:547-552.

Lovisolo, O. 1980.Virus and viroid diseases of cucurbits. Acta Horticulture, 88:979-982.

Massumi, H., Samei, A., Hosseini pour, A., Shaabanian, M. & Rahimian, H. 2007. Occurrence, distribution, and relative incidence of seven viruses infecting greenhouse-grown cucurbits in Iran. Plant Diseases, 91:159-163.

Provvidenti, R. 1996. Diseases caused by viruses , pp:37-45. In: Zitter, T. A., Hopkins, D. L. & Thomas, C. E. (Eds.) Compendium of Cucurbit  Diseases, Minnesota, USA, APS press.

Ghorbani S. 1998. Isolation of zucchini yellow mosaic virus in Tehran province. Journal of Plant Pathology, 24:25-34.

Raccah B., Gal-On A. & Eastop VF. 1985. The role of flying aphid vectors in the transmission of cucumber mosaic virus and potato virus Y to peppers in Israel. Annals of Applied Biology, 106:451-460.

Rahimian, H. & Izadpanah, K. 1978. Identity and prevalence of mosaic inducing cucurbit viruses in Shiraz, Iran. Phytopathology, 92:305-312.

Rastgou, M., Koohi Habibi, M., Izadpanah, K. & Masahebi, Gh. H. 2010. Frequency of cucurbit viruses around Urmia and first report of Zucchini yellow fleck virus. Proceeding of the 19th Iran Plant Protection Congress, Iranian Research Institute of Plant Protection, p. 755.

Statistics Letter of Fars Agricultural Bureau. Horticultural and Crop Products. 2012. First edition.

Ullman, D. E., Cho, J. J. & German TL. 1991. Occurrence and distribution of viruses in Hawaiian Islands. Plant Diseases, 75:367-370.

Zhang, X. S., Holt, J. & Colvin, J. 2001. Synergism between plant viruses: A mathematical analysis of the epidemiological implications. Plant Pathology, 50:732-746.